
产品名称:pGEX-4T-1别称pGEX4T1;pGEX4T-1
特征特性:
宿主:大肠杆菌,片段类型:ORF,片段物种:空载体,原核抗性:Amp,启动子:Tac,复制子:pBR322,拷贝数:低,感受态:DH5a,温度:37度,正向引物:pGEX-5':GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG,反向引物:pGEX-3':CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG,诱导方式:IPTG
主要用途:蛋白表达
使用方法:
干粉质粒:①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;②从-80°C冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;③取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;④42°C热激90s,再冰浴2min;⑤加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;⑥6000rpm离心5min,仅留100μl上清混匀菌体沉淀;⑦混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;⑧将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;⑨挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。注意:如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
规格:干粉(现货),大提液体(一周)
保存说明:
①干粉质粒:90天,请尽快转化。保存温度:一般在-20°C,置于-80°C保存时间更长。②液体质粒:存于-20℃,保质期90天。③滤纸质粒:存于-20度,保质期90天,请务必先转化提质粒后使用。
灰藻生物
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